El CO₂ (diòxid de carboni), un dels productes resultants de la fermentació, entra en la proveta. Al ser més dens que l'aire, va ocupant el volum de la proveta, desplaçant a l'oxígen. Quan el CO₂ arribi al nivell de l'espelma l'apagarà.
També es pot recollir el gas en un tub d'assaig i si el girem ràpidament, perquè caigui sobre un llumí encès l'apagarà ja que el CO₂ desplaçarà l'aire i no podrà continuar la combustió.

El mètode de detecció de si hi ha CO₂ en l'interior d'un cup es continua fen baixant acompanyat d'una espelma per sota del nivell de respiració de la persona, en el supòsit que s'apagui la flama es dóna coneixement de la presència de CO₂ i per tant s'ha de ventilar i lògicament prendre les corresponents precaucions per evitar la mort per asfíxia.