Práctica nº________________ Fecha______________

ORGANISMOS UNICELULARES (I):PROTOZOOS

OBJETIVO

Demostrar que existen seres constituidos por una sola célula y observar las distintas modificaciones de estas células libres.

Material de trabajo

Microscopio

Soporte de tinciones

Portaobjetos

Cubreobjetos

Pipetas o cuentagotas largos

Aguja enmangada

Colorante (solución de rojo neutro al 0.5%)

Papel de filtro

Papel de seda

Aceite de inmersión

Xilol

I OBSEVACIÓN DE MICROORGANISM0S DE AGUAS ESTANCADAS

Método

A).-Preparación de las muestras (realización de una infusión):

1.- Llenar los 2/3 de un cristalizador con agua de grifo y añadir unas cuantas hojas de diferentes vegetales (especialmente heno, paja o puerros), previamente maceradas.

2.- Hervir el contenido de este recipiente durante 10-30 minutos, al cabo de los cuales se retirará del fuego, ( es conveniente que se haya evaporado más de la mitad del agua existente al principio)

3.- Dejar enfriar unas horas ( todo un día, prácticamente).

4.- Verter unos 200 cc del agua recogida de una charca, junto con fango del fondo, algo de materia sobrenadante y hojas en descomposición. Si se dispone de muestras de distintas charcas, marcas los cristalizadores, identificando lo que corresponden a cada muestra.

5.- Mantener el cristalizador a temperatura ambiente (20-22 ºC), durante unos días, sin exponer directamente a los rayos del sol

6.-A los pocos días se pueden añadir unos cuantos granos de arroz o un poco de yema de huevo duro para favorecer el crecimiento de bacterias que luego favorecerán el crecimiento de protozoos.

7.- Transcurridos 15 días, más o menos, (a veces gasta con 4-10 días), comenzar la toma de muestras. Se observará que ha aparecido una telilla sobre la superficie de la infusión.

B) Observación de las muestras:

1.- Recoger, con diferentes pipetas o cuentagotas, un poco de líquido de distintas zonas del cristalizador ( fondo, zonas intermedia, superficie, paredes, etc.…), teniendo cuidado de no remover la infusión y colocando cada gota extraída de una zona diferente en portaobjetos distintos.

2.- Colocar encima de cada portaobjetos el correspondiente cubreobjetos, procurando que no haya una excesiva cantidad de agua.

3. Puede teñirse alguna preparación colocando una gota neutro antes de la gota de agua, o bien, después de colocar el cubre y junto al borde de éste (el agua penetrará en el espacio que entre porta y cubre por capilaridad)

4.- Observar al microscopio, a pequeño aumento. La primera observación conviene hacerla de una gota de la superficie de la infusión.

Estos organismos son casi transparentes, por ello debe cerrarse un poco el diafragma, de forma que el campo visual aparezca poco iluminado (abrir y cerrar ligeramente el diafragma según convenga con cada organismo distinto).

Algunos Protozoos son muy rápidos, por lo que su observación resulta muy difícil al principio; sin embargo, transcurridos 5-10 minutos van disminuyendo considerablemente su movilidad.

Cuando se consigua tener inmovilizado un ejemplar, pasar objetivos de mayor aumento, hasta llegar al objetivo de inmersión, si fuese necesario.

Cuestiones y observaciones

1.- Dibujar los protozoos que se hayan observado y tratar de identificarlos según los ejempleras del esquema adjunto, clasificándolos en Flagelados, Ciliados y Rizópodos.

2.- Describir los tipos de movimientos observados en los distintos en los distintos organismos.

3.- ¿Se ha observado alguna forma de captar el alimento? En caso afirmativo, describirla.

4.- Describir otras observaciones realizadas que merezcan ser mencionadas.

5.- ¿ Por qué al realizar las infusiones es aconsejable hervir el agua del grifo antes de añadir el agua recogida de una charca?

6.- ¿Por qué se recomienda tomar muestras de distintas zonas del cristalizador? ¿Se ha observado alguna diferencia entre estas muestras?

7.- ¿Por qué, transcurridos unos minutos de realizada preparación, la movilidad de los Protozoos disminuye?